美國(guó)NIST的 IgG1κ 單克隆抗體 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（RM 8671）主要用于評(píng)估確定單克隆抗體的物理化學(xué)和生物物理屬性的方法的性能。它還為開(kāi)發(fā)用于治療性蛋白質(zhì)表征的新技術(shù)提供了一個(gè)具有代表性的測(cè)試分子。此外IgG1κ 單克隆抗體 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（RM 8671）可用于多種用途，包括系統(tǒng)適用性測(cè)試、確定方法或儀器性能和可變性、比較變化的分析測(cè)試方法以及協(xié)助方法鑒定。

包裝規(guī)格：

         RM8671由一個(gè)內(nèi)螺紋聚丙烯冷凍管組成，其中含有 800 µL 10 mg/mL NIST IgG1κ 單克隆抗體 (NISTmAb)，溶于 12.5 mmol/L L-組氨酸、12.5 mmol/L L-組氨酸 HCl (pH 6.0) ）。

        美國(guó)NIST的gG1κ 單克隆抗體 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（RM 8671）是一種在鼠懸浮培養(yǎng)中表達(dá)的重組人源化 IgG1κ，并經(jīng)過(guò)生物制藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的上游和下游純化，以去除工藝相關(guān)的雜質(zhì)。它是通過(guò)鏈間和鏈內(nèi)二硫鍵連接的兩條輕鏈和兩條重鏈亞基的約 150 kDa 同源二聚體。該分子具有高豐度的 N 末端焦谷氨酰胺化、C 末端賴(lài)氨酸剪切和重鏈糖基化。該蛋白質(zhì)還具有低豐度的翻譯后修飾，包括蛋氨酸氧化、脫酰胺和糖化 [1-4]。這些和其他產(chǎn)品質(zhì)量屬性在 ACS Symposium 系列中針對(duì)第一批臨時(shí)材料進(jìn)行了廣泛的描述，在本文中用作主要樣品 (PS) [5-7]。

有效期：非認(rèn)證值在規(guī)定的測(cè)量不確定度內(nèi)有效，直到 2026 年 4 月 29 日。如果材料存儲(chǔ)或使用不當(dāng)、損壞、污染或以其他方式修改，則賦值無(wú)效。

非認(rèn)證值：NIST 非認(rèn)證值是基于當(dāng)前可用信息的最佳估計(jì)值，從 1987 年到 2020 年 7 月被稱(chēng)為“參考值"或“信息值"[8]。非認(rèn)證值適用于方法開(kāi)發(fā)、方法協(xié)調(diào)和過(guò)程控制，但不提供對(duì)國(guó)際單位制 (SI) 或其他高階參考系統(tǒng)的計(jì)量溯源。

表 1 至表 5 中提供了 IgG1κ 單克隆抗體 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（RM 8671）的非認(rèn)證值。此 RMIS 中描述的特定協(xié)議和結(jié)果的全面擴(kuò)展可在參考文獻(xiàn) [9-13] 中找到。質(zhì)量濃度非認(rèn)證值：表 1 中列出的質(zhì)量濃度值基于在 280 nm 處測(cè)得的十進(jìn)制衰減 D。十進(jìn)制衰減 D 被計(jì)算為透射率的負(fù)對(duì)數(shù)（以 10 為底），它類(lèi)似于吸光度，除了包含對(duì)離開(kāi)樣品的輻射功率的散射和發(fā)光效應(yīng) [14]。 NISTmAb 的濃度通過(guò)使用 1.42 mL · mg-1 · cm-1 [15,16] 的理論消光系數(shù) (ε) 確定。該值是根據(jù) [16] 報(bào)告的方法計(jì)算的，并進(jìn)一步校正了 0.977 [15] 的聚糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)校正因子?？梢栽趨⒖嘉墨I(xiàn) [9] 中找到分析方法的詳細(xì)信息以及對(duì)與此質(zhì)量濃度測(cè)量相關(guān)的不確定性的貢獻(xiàn)。

物理化學(xué)非認(rèn)證值：IgG1κ 單克隆抗體 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（RM 8671）的物理化學(xué)屬性使用合格的尺寸排阻色譜 (SEC)、毛細(xì)管十二烷基硫酸鈉電泳 (CE-SDS)、毛細(xì)管區(qū)帶電泳 (CZE) 和動(dòng)態(tài)光散射 (DLS) 方法進(jìn)行測(cè)量 [10 ,11]。使用原始樣品 (PS) 對(duì)這些分析測(cè)定進(jìn)行了鑒定，以建立方法性能標(biāo)準(zhǔn)。資格驗(yàn)證活動(dòng)以 ICH Q2(R1) 方法驗(yàn)證指南為模型，包括評(píng)估線性、檢測(cè)限 (LOD)/定量限 (LOQ)、范圍和精密度（可重復(fù)性和一些中間精密度）。表 2、3、4 和 5 中提供的物理化學(xué)值是通過(guò)使用每種合格方法（SEC、CE-SDS、DLS 和 CZE）分析 Lot 14HB-D-002 來(lái)認(rèn)定的，同時(shí)用儀器認(rèn)證 (IQ) 括起每個(gè)分析標(biāo)準(zhǔn)和 PS 以確保系統(tǒng)適用性。 IQ 標(biāo)準(zhǔn)和 PS 都需要通過(guò)從方法鑒定得出的預(yù)定義方法性能標(biāo)準(zhǔn)。可以在參考文獻(xiàn) [9-11] 中找到分析方法的詳細(xì)信息以及對(duì)與測(cè)量相關(guān)的不確定性的貢獻(xiàn)。在參考文獻(xiàn) [9-13] 中可以找到關(guān)于物理化學(xué)測(cè)量的特定協(xié)議和結(jié)果的全面擴(kuò)展。

附加信息：包括流動(dòng)成像分析和肽圖鑒定測(cè)試在內(nèi)的附加物理化學(xué)表征方法也適用于 RM 8671，并在附錄 A 中報(bào)告。

儲(chǔ)存：RM 用干冰運(yùn)輸，運(yùn)輸過(guò)程中應(yīng)保持冷凍狀態(tài)。材料應(yīng)在收到后立即在 -80 °C 下冷凍保存。對(duì)一系列穩(wěn)定性樣品進(jìn)行了評(píng)估，以確定最佳的儲(chǔ)存條件，在該條件下，樣品可能會(huì)在給定的方法中保持其物理化學(xué)性能 [9]。在所有情況下，最好將材料儲(chǔ)存在 -80 °C。如果需要在 -80 °C 以外的條件下制備和/或儲(chǔ)存等分試樣，則在給定條件和某些預(yù)期用途下推薦的最長(zhǎng)儲(chǔ)存時(shí)間列于表 6。

處理和使用說(shuō)明：應(yīng)將小瓶從 -80 °C 冰箱中取出，在室溫下解凍約 30 分鐘或直至沒(méi)有殘留冰晶。一旦解凍，小瓶應(yīng)輕輕倒置五次，以減輕冷凍過(guò)程中可能形成的任何濃度梯度。然后，小瓶應(yīng)在微型離心機(jī)中快速旋轉(zhuǎn)，以沉淀任何可能仍粘附在小瓶蓋或內(nèi)螺紋上的溶液。一旦打開(kāi)，小瓶?jī)?nèi)容物應(yīng)立即使用和/或根據(jù)材料的預(yù)期用途在表 6 中列出的預(yù)定義條件下儲(chǔ)存?？梢酝ㄟ^(guò)轉(zhuǎn)移等分試樣并稀釋至適當(dāng)體積來(lái)制備較低濃度的蛋白質(zhì)溶液。 RM 不提供稀釋劑；然而，可以使用含水稀釋劑，例如制劑緩沖液（12.5 mmol/L L-組氨酸，12.5 mmol/L L-組氨酸 HCl，pH 6.0）。 NIST 尚未在稀釋或濃縮條件下對(duì)材料的溶解度和穩(wěn)定性進(jìn)行全面測(cè)試，因此可能不符合本文所述分析測(cè)定的預(yù)期。